ABSTRACT
Adjuvants play an important role in vaccine formulations by increasing their immunogenicity. In this study, the phenolic compound-rich J fraction (JFR) of a Brazilian green propolis methanolic extract stimulated cellular and humoral immune responses when co-administered with an inactivated vaccine against swine herpesvirus type 1 (SuHV-1). When compared to control vaccines that used aluminium hydroxide as an adjuvant, the use of 10 mg/dose of JFR significantly increased (p < 0.05) neutralizing antibody titres against SuHV-1, as well as the percentage of protected animals following SuHV-1 challenge (p < 0.01). Furthermore, addition of phenolic compounds potentiated the performance of the control vaccine, leading to increased cellular and humoral immune responses and enhanced protection of animals after SuHV-1 challenge (p < 0.05). Prenylated compounds such as Artepillin C that are found in large quantities in JFR are likely to be the substances that are responsible for the adjuvant activity.
Subject(s)
Animals , Mice , Antibodies, Viral/immunology , Herpesvirus 1, Suid/immunology , Herpesvirus Vaccines/immunology , Propolis , Pseudorabies , Adjuvants, Immunologic , Immunity, Cellular/immunology , Immunity, Humoral/immunology , Mice, Inbred BALB C , Pseudorabies/immunology , Swine , Vaccines, Inactivated/immunologyABSTRACT
Microemulsion systems (MES) offer advantages as drug delivery systems, among them favour drug absorption, being in most case more efficient than other methods in delivering of drug. In this work a new MES was obtained in order to be applied as a pressurized aerosol formulation containing bee propolis ethanolic extract (PEE). For that, pseudoternary phase diagrams were used to characterize the microemulsions boundaries and also to define the Winsor IV microemulsion region of the PEE-MES system containing Tween 80 as surfactant and the cosurfactant ethyl alcohol in small percentage. The obtained results indicated that the best MES was composed by Tween 80 and ethyl alcohol with C/S (cosurfactant/surfactant) ratio equal to 1.0, since it provided a large boundaries in the obtained O/W microemulsion region. This PEE-MES formulation, in which bee propolis consisting as oil phase, is herein designed for topical uses (PEE-MES spraying) in order to treat mouth and throat inflammatory infections. Considering the very large uses of bee propolis in conventional vehicles, MES type of delivery system has to be compatible with achieving the highest drug aim loadings, determined substantially by the specific MES application (drug solubilization in water systems) improving in this case, propolis farmacological aplications. Additionally, PEE-MES antibacterial effect was evidenced and the microemulsion system PEE-MES was also used as newest chemical approach for extraction of bee propolis material from resinous hive.
Sistemas microemulsionados (MES) oferecem inúmeras vantagens como liberadores de fármacos já que favorecem a absorção do princípio ativo e são, em muitos casos, mais eficientes do que outros métodos de liberação de substâncias bioativas. Neste trabalho, um MES foi obtido visando uma formulação para uso tópico, contendo extrato etanólico de própolis (PEE). Neste estudo, Diagramas de fase pseudoternários foram utilizados para caracterização das regiões de microemulsão, bem como para definição da região de Winsor IV do sistema PEE-MES (Tween 80 como tensoativo e álcool etílico como co-tensoativo, em baixo percentual). Os resultados obtidos indicaram que o melhor sistema microemulsionado contém C/S (cotensoativo/tensoativo) na razão 1,0, fornecendo uma microemulsão do tipo O/A com ampla região de Winsor IV. A formulação PEE-MES poderá vir a ser utilizada comercialmente para uso tópico no combate a inflamações de boca e garganta. Considerando o amplo uso de própolis em formulações convencionais, onde sua solubilidade representa um dos maiores problemas, o sistema PEE-MES disponibiliza este produto natural para aplicações farmacológicas, com boa solubilidade em um sistema microemulsionado do tipo O/A. Adicionalmente, o efeito bactericida do sistema PEE-MES foi comprovado e uma nova metodologia de extração de própolis é apresentada.
ABSTRACT
Própolis brasileira, proveniente do estado de São Paulo, foi submetida à extração usando vários solventes, resultando em extratos com diferentes composições. Estes extratos foram submetidos à Cromatografia em Camada Delgada (CCD). Análise bioautográfica das placas de CCD permitiu identificar as frações com atividade antimicrobiana, que foram então analisadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Ensaios in vitro freqüentemente utilizados para avaliar a atividade de própolis frente a bactérias Gram-positivas foram comparados para determinar qual renderia os resultados mais consistentes. A atividade bactericida destes extratos foi analisada por Diluição Seriada em Tubos e por testes de Difusão em Agar. O método de Diluição em Tubos permitiu obter os resultados mais consistentes e a Concentração Bactericida Mínima dos extratos variou entre 2,5 e 20,0 mg/mL, para as espécies de bactérias Gram-positivas testadas. Os resultados do método de Difusão em Agar foram diretamente proporcionais à hidrossolubilidade dos extratos, e não avaliaram a atividade bactericida corretamente. A atividade bactericida desta amostra resultou da combinação de vários componentes, identificados por CLAE, que foram extraídos preferencialmente usando etanol 50 per center como solvente.